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液相色譜柱的平衡和日常使用保養(yǎng)方法

點擊次數(shù):894 更新時間:2022-09-22 返回
   液相色譜柱的平衡:
  由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。一定確保分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱,就會在處理問題方面獲得較大的"補償",而且色譜柱的壽命也會變得更長!
  操作步驟:
  a、平衡開始時將流速緩慢地提高,用色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長的時間來平衡)。
  b、如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡;分析結束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護柱子。
 
  液相色譜柱的日常使用保養(yǎng):
  ·使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度);
 
  ·注意色譜的pH范圍,大多數(shù)色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-8;
 
  ·避免流動相組成及極性的劇烈變化;
 
  ·使用HPLC級試劑,流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理;
 
  ·如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢將柱子沖洗干凈并保存在乙腈中;
 
  ·壓力升高是需要更換預柱的信號;
 
  ·確認流動相中緩沖鹽的溶解性;
 
  ·確認樣品在流動相中的溶解性;
 
  ·避免壓力的突變。
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